期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
大鼠白细胞介素-10 cDNA的克隆
陈家存；畅继武；马腾骧
关键词：大鼠, 白细胞介素-10, 克隆
摘要：目的克隆大鼠白细胞介素-10(IL-10)cDNA的全长序列,为其分子生物学利用奠定基础.方法无菌条件下切取大鼠的脾脏,收集脾细胞,用脂多糖(LPS)刺激培养4 h;离心得到一定量细胞,加入变性液,一步法提取细胞总RNA;逆转录合成IL-10的第1条链,用自己设计的特异性上下游引物进行PCR扩增,得到期望相对分子质量的PCR产物;酶切后插入pcDNA3载体,转染感受态细胞进行筛选制备,并行PCR、酶切鉴定和测序.结果脾细胞经LPS刺激后IL-10转录水平增加,从提取的RNA转录产物中容易扩增出期望相对分子质量的PCR产物,酶切和PCR鉴定证明所得IL-10 cDNA相对分子质量与基因库报告的相近,测序结果表明得到的IL-10 cDNA序列与基因库报告的序列完全一致.结论大鼠的IL-10 cDNA全长序列被成功克隆.
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