期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
人白细胞介素-10 cDNA的克隆
刘俊杰；陈家存；胡书群；陆梁；裴冬生
关键词：人, 白细胞介素-10, 克隆
摘要：目的克隆人白细胞介素10(hIL-10)cDNA的全长序列,为其分子生物学利用奠定基础.方法无菌条件抽取正常成人外周血15ml,分离单核细胞,用刀豆素A(ConA)刺激培养24h;离心得到一定量细胞,加入变性液,一步法提取细胞总RNA;反转录合成IL-10的第1条链,用自己设计的特异性上下游引物进行PCR扩增,得到期望分子量的PCR产物;酶切后插入PcDNA3载体,转染感受态细胞进行筛选制备,并行酶切鉴定和测序.结果外周血单核细胞经ConA刺激后IL-10转录水平增加,从提取的RNA反转录产物中容易扩增出期望分子量的PCR产物,酶切鉴定证明得到的IL-10 cDNA分子量与基因库报告的相近,测序结果表明得到的IL-10 cDNA序列与基因库报告的序列完全一致.结论人的IL-10 cDNA全长序列被成功克隆.
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