期刊简介

               本刊系医药卫生类综合性学术期刊,主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。                

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  • 杂志名称:徐州医科大学学报杂志
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:徐州医科大学
  • 国际刊号:2096-3882
  • 国内刊号:32-1875/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
徐州医科大学学报杂志2004年第04期

抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及其原核表达载体的构建

陈家存;张俊杰;温儒民;薛松;胡书群;孙亚峰;裴冬生

关键词:膀胱肿瘤, 基因, 抗体, 单克隆, 可变区, 原核表达载体
摘要:目的克隆抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因(VL),并构建其原核表达载体.方法从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI-1中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出VL cDNA.用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT-PCR产物和原核表达载体pET28a(+),在T4 DNA连接酶作用下室温连接,重组质粒经酶切鉴定,阳性克隆测序并进行序列分析.结果扩增出VL cDNA片段,大小约为340bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致.VL基因序列长度为324bp,编码108个氨基酸.VL基因属于鼠免疫球蛋白κ轻链Ⅳ亚类.结论成功克隆出抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因,并成功构建其原核表达载体.