期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达
温儒民；刘俊杰；陈家存；胡书群；裴东生
关键词：人, 白细胞介素-10, 克隆, 表达
摘要：目的克隆人IL-10 cDNA的全长序列,构建原核表达载体并诱导其表达.方法无菌条件下静脉采取正常人外周血10 ml.加入等体积的生理盐水稀释后,加入淋巴细胞分离液,离心收集细胞,提取细胞总RNA.以细胞总RNA为模板,进行RT-PCR,克隆出IL-10 cDNA,经双酶切后插入表达载体pMon中,用pMon-IL10重组体转染大肠杆菌DH5α.用萘啶酮酸诱导使重组人IL-10在大肠杆菌中表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳及Western-blot分析.结果人外周血单核细胞经ConA刺激后,IL-10转录水平增加,有利于IL-10 cDNA的克隆;克隆的IL-10 cDNA经测序证实与基因库报告的序列完全一致,插入pMon载体后经萘啶酮酸诱导能够在大肠杆菌DH5α表达;表达的蛋白质能与兔抗人IL-10特异性结合.结论人IL-10 cDNA被成功克隆并能够在大肠杆菌中表达.
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