期刊简介

               本刊系医药卫生类综合性学术期刊,主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。                

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  • 杂志名称:徐州医科大学学报杂志
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:徐州医科大学
  • 国际刊号:2096-3882
  • 国内刊号:32-1875/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
徐州医科大学学报杂志2007年第10期

电穿孔法提高hTERT转染原代培养乳鼠心肌细胞效率的研究

冯建启;余细勇

关键词:电穿孔法, 人端粒酶逆转录酶基因, 基因转染, 心肌细胞
摘要:目的 探讨提高人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)转染原代培养乳鼠心肌细胞效率的有效方法.方法 通过测量悬浮心肌细胞的半径,估计电击穿时临界电压的范围.以钙黄素为报告分子,确定佳可逆性电击穿时电压范围.进而用pAdtrack-GFP-hTERT对乳鼠心肌细胞进行转染,并通过绿色荧光蛋白(GFP)的表达比较电穿孔、Lipofectamine 2000和Top Easy 3种转染方法对hTERT的转染效率.结果 电压170~200 V,波宽2 ms左右,间隔125 ms,脉冲4~6个时,pAdTrack-GFP-hTERT可有效转染乳鼠心肌细胞,转染率高达7.5%,而Lipofectamine 2000法和Top Easy法转染率均为0(P<0.01).结论 利用电穿孔技术可将hTERT长cDNA片段导入原代培养的乳鼠心肌细胞.