期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
RNA干扰抑制RPA70基因质粒载体的构建与鉴定
顾玉明；王洵；裴冬生；郑俊年
关键词：复制蛋白A70, 重组质粒, 短发夹RNA, RNA干扰, 食管肿瘤
摘要：目的 构建含复制蛋白A 70(RPA70)基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,诱导RNA干扰(RNA interference,RNAi).方法 根据GenBank中RPA70基因的mRNA序列,设计、合成2条反向重复多聚寡核苷酸序列,退火形成双链DNA.利用分子克隆技术,将含RPA70基因的双链DNA与经双酶切后的载体pSi-U6-GFP-Neo连接,构建pSi-U6-GFP-Neo-shRNA-RPA70重组质粒,通过DNA测序证实表达质粒构建成功.设空白对照组、阴性对照组及实验组,在脂质体2000的介导下转染食管癌TE-1细胞株,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达情况.结果 DNA测序证实含RPA70基因的shRNA表达质粒构建成功.结论 成功地构建了重组质粒pSi-U6-GFP-Neo-shRNA-RPA70,为下一步干扰实验奠定了基础.
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