期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊,主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志

- 杂志名称:徐州医科大学学报杂志
- 主管单位:江苏省教育厅
- 主办单位:徐州医科大学
- 国际刊号:2096-3882
- 国内刊号:32-1875/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
表达抗G250人源性抗体腺病毒对肾癌细胞的影响
方琳;程乾;李望;刘俊杰;郑骏年
关键词:G250, 人源性全长单克隆抗体, 放射免疫显像, 肾肿瘤
摘要:目的 检测腺病毒Ad-G250表达的G250全长人源性抗体的生物学活性及其对肾癌细胞的影响.方法 扩增纯化腺病毒Ad-G250、Ad-EGFP(对照病毒).病毒感染LO-2细胞,ELISA法检测细胞培养液中抗体的表达量.收集病毒感染后的细胞上清液进行纯化,Western blotting检测纯化抗体的相对分子质量及其与细胞表面G250抗原的结合能力.免疫组化法检测Ad-G250表达的抗体是否具有生物学活性.CCK-8法检测Ad-G250对肾癌Ketr-3及ACHN细胞增殖的影响.Annexin V-PE/7-AAD法检测Ad-G250对肾癌Ketr-3及ACHN细胞凋亡的影响.结果 病毒Ad-G250感染LO-2细胞后G250抗体的表达量随着感染天数的增加而增加.Western blotting实验显示Ad-G250能够表达G250抗体的轻链和重链,电泳图上该抗体能使G250抗原阳性的Ketr-3和786-O细胞在相对分子质量58×103附近出现反应条带,而G250抗原阴性的ACHN和HK-2细胞在相应位置无反应条带.细胞免疫组化实验显示Ketr-3细胞膜被染成棕黄色,而ACHN细胞未见着色.CCK-8实验结果显示,Ad-G250对Ketr-3细胞有抑制作用,而对ACHN细胞的抑制作用不明显;Ad-G250抑制Ketr-3细胞增殖存在浓度及时间依赖性.凋亡实验显示,Ad-G250诱导Ketr-3细胞凋亡作用和ACHN细胞相比差异具有统计学意义,Ad-G250诱导Kert-3凋亡作用和Ad-EGFP相比差异有统计学意义.结论 腺病毒Ad-G250成功表达出具有生物学活性的人源性G250抗体,且Ad-G250可抑制表达G250抗原的肾癌细胞增殖,诱导其凋亡.
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