期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
表达抗G250人源性抗体增殖缺陷型腺病毒的构建
方琳；程乾；李望；刘俊杰；郑骏年
关键词：肾肿瘤, G250, 抗体, 增殖缺陷型腺病毒, 重组腺病毒
摘要：目的 构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒.方法 通过重叠延伸PCR、常规PCR方法,分别获得G250重链的可变区和恒定区(GH)cDNA序列及G250轻链(GL) cDNA序列,并克隆至pCLON12-IRES载体上,构建质粒pCLON12-GL-IRES-GH.酶切质粒pCLON12-GL-IRES-GH回收GL-IRES-GH片段,克隆至腺病毒载体pDC315,构建pDC315-GL-IRES-GH(pDC315-G250).将pDC315-G250与腺病毒包装骨架质粒pBHGE3共转染HEK293细胞,重组包装表达G250抗体的增殖缺陷型腺病毒AdDC315-G250.纯化病毒表达的G250抗体,免疫印迹实验检测该抗体能否与细胞表面抗原特异性结合.结果 PCR及测序结果表明成功构建质粒pCLON12-GL-IRES-GH及腺病毒穿梭质粒pDC315-G250.PCR鉴定表明重组腺病毒AdDC315-G250含有目的 基因,病毒包装成功.免疫印迹实验结果显示,纯化的抗体在G250抗原阳性的细胞中能检测到目的 条带.结论 成功构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒.
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