期刊简介

               本刊系医药卫生类综合性学术期刊,主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。                

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  • 杂志名称:徐州医科大学学报杂志
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:徐州医科大学
  • 国际刊号:2096-3882
  • 国内刊号:32-1875/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
徐州医科大学学报杂志2015年第11期

大鼠Somatostatin基因重组慢病毒载体的构建与检测

魏云艳;赵莉娟;孙蒙蒙;王瑾;于佳田;王德广

关键词:生长抑素, 神经元突触素启动子, 慢病毒载体, 构建
摘要:目的:克隆大鼠生长抑素somatostatin(SST)基因和神经元突触素Synapsin(Syn1)的启动子序列,构建神经元特异性表达SST基因的重组慢病毒载体。方法采用RT-PCR法和PCR法分别扩增SST基因和Syn1的启动子序列,并将其克隆至重组慢病毒载体系统(Lenti-EGFP),构建出以Syn1启动子序列为启动子、携带SST基因的表达质粒Lenti-pSyn-SST-2A-EGFP;再将该表达质粒与pMDL、pRev和 pVSVG用磷酸钙共沉淀法共转染HEK293 T细胞,获得重组的慢病毒载体,将病毒注射入大鼠海马,检测EGFP和SST的表达效果。结果经测序克隆的SST和Syn1启动子与GenBank上的序列相比完全一致,并测得SST重组慢病毒纯化后病毒滴度为1.5×109 TU/ml,该病毒注射入海马可以转染神经元并表达SST。结论成功构建出以Syn1启动子序列为启动子,携带SST基因的重组慢病毒载体。