期刊简介

               本刊系医药卫生类综合性学术期刊,主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。                

首页>徐州医科大学学报杂志
  • 杂志名称:徐州医科大学学报杂志
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:徐州医科大学
  • 国际刊号:2096-3882
  • 国内刊号:32-1875/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
徐州医科大学学报杂志2015年第10期

小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌中的表达与纯化

石小东;胡蕊;高灿

关键词:EphB2, FN结构域, 原核表达, 亲和层析
摘要:目的:将小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌细胞中进行表达与纯化,以便于研究与FN结构域相互作用的蛋白质。方法以重组质粒GV287-EphB2作为模板,经PCR扩增,得到FN结构域的cDNA片段,并将其克隆至pET-28a载体中。将重组质粒pET-28a-FN转化至大肠杆菌BL21( DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,利用SDS-PAGE检测FN-His6融合蛋白的表达。后采用Ni-NTA亲和层析法对该蛋白进行纯化。结果本研究成功地构建了FN结构域的原核表达载体。经鉴定,FN-His6融合蛋白能够在大肠杆菌中表达。纯化后,得到少量可溶性FN-His6融合蛋白。结论小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域可以在大肠杆菌中表达并纯化,为研究与FN结构域相互作用的蛋白奠定了实验基础。