期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
Kif18A 的 SUMO 化修饰及其调控机制
李艳；夏南松；左勇
关键词：KIF18A, SUMO化修饰, 细胞周期
摘要：目的：探讨 Kif18A 的 SUMO 化修饰及其调控机制。方法在 HEK293T 细胞中共转染 Flag －Kif18A、HA －SUMO1或 His －SUMO1质粒，免疫沉淀富集 Flag －Kif18A，免疫印迹检测 HA －SUMO；用 TALON 树脂富集His －SUMO1蛋白，免疫印迹检测 Flag －Kif18A 考察 Kif18A 的 SUMO 化水平。利用 SUMOsp 2．0软件预测Kif18A 可能发生 SUMO 化的潜在位点，将 Flag －Kif18A 质粒中的相应位点上的编码序列由 Lys 突变成 Arg，在HEK293T 细胞中表达突变体后再检测 Kif18A 的 SUMO 化水平的变化来确定 Kif18A 的 SUMO 化位点。通过在HEK293T 细胞中共染转 Flag －Kif18A、HA －SUMO1以及 SENP1野生型（WT）或 SENP1酶活位点突变型（Mut）质粒，再采用免疫沉淀和免疫印迹检测 Kif18A 的 SUMO 化水平，来证明 SENP1是 Kif18A 的去 SUMO 化蛋白酶。后，用 Nocodazole 处理 HeLa 细胞，使其同步化在 G2／M 阶段，再考察 G2／M 期 HeLa 细胞中 Kif18A 的 SUMO 化水平。结果Kif18A 能被 SUMO1或者 SUMO2修饰，K47和 K148是 Kif18A 发生 SUMO 化的两个主要位点，SENP1催化 Kif18A 的去 SUMO 化修饰。 HeLa 细胞同步化在 G2／M 期后，Kif18A 的 SUMO 化水平显著下降。结论Kif18A 能发生 SUMO 化修饰，且其 SUMO 化受到细胞有丝分裂进程的调控。
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