期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
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首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
小鼠心脏成纤维细胞直接转分化为心脏祖细胞的实验研究
王韵茹；李勇；厉传艺；惠洪亮；董红燕；张中明
关键词：心脏成纤维细胞, 谱系重编程, 心脏祖细胞
摘要：目的：采用非特异性转录因子介导的谱系重编程系统，将小鼠心脏成纤维细胞（ cardiac fibroblasts ， CFs）直接转分化为心脏祖细胞（ cardiac progenitor cells ，CPCs）。方法取昆明小鼠乳鼠心肌组织，差速贴壁法分离CFs。免疫荧光染色、流式细胞术分别检测CFs性状及纯度，以携带含小鼠tet－on系统的4种重编程因子Oct4、Sox2、Klf4、c－myc（OSKC）慢病毒等比例感染第3代（P3）CFs。 A组：感染含小鼠tet－on系统的OSKC慢病毒，重编程培养基中不加入白血病抑制因子（LIF），加入JAK inhabit 1（JI1），以抑制向iPSCs方向的转分化。 B组：对照组感染空载体病毒。 C组：感染含小鼠tet－on系统的OSKC慢病毒，重编程培养基中加入LIF，不加入JI1，不抑制向iPSCs方向的转分化。在特定时间点为感染的细胞更换不同培养条件，观察细胞形态及生物特性的变化：①实时荧光定量PCR（Real time－PCR）法检测重编程各个时间点CPCs特异性转录因子Mesp1、Nkx2．5、Isl1、GATA4及胚胎干细胞多能性因子Oct4、Sox2、c－myc、Klf4、Naong的表达；②CPCs特异性标记Nkx2．5、Isl1免疫荧光染色鉴定；③CPCs自分化为搏动心肌细胞的检测；④心肌细胞特异性标记cTnI免疫荧光染色鉴定CPCs向心肌细胞方向的分化潜能。结果①形态学观察，病毒感染11～14天，可见部分CFs形态发生改变，形成CPCs样克隆；②CPCs克隆Nkx2．5、Isl1免疫荧光染色阳性；③CPCs可自分化为搏动的细胞团，其中的细胞cTnI免疫荧光染色阳性；④Real－time RCR检测结果显示，重编程第4天，CPCs早期特异性转录因子Mesp1即开始表达，而iPSCs多能性因子Naong在重编程第9天才开始表达。结论心脏成纤维细胞可以直接转分化为CPCs。
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