期刊简介

               本刊系医药卫生类综合性学术期刊,主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述,也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。                

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  • 杂志名称:徐州医科大学学报杂志
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:徐州医科大学
  • 国际刊号:2096-3882
  • 国内刊号:32-1875/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
徐州医科大学学报杂志2016年第06期

长双歧杆菌抗毒素基因mazE细菌双杂交诱饵质粒的构建与鉴定﹡

李阳;杨帆;韦艳霞;郑葵阳;汤仁仙

关键词:mazEF, 细菌双杂交系统, 诱饵载体, 长双歧杆菌
摘要:目的:构建细菌双杂交系统中的诱饵载体pBT-mazE,为长双歧杆菌的压力调控机制研究奠定基础。方法 PCR扩增抗毒素蛋白MazE的编码基因,插入到带有λcI基因的载体pBT构建诱饵质粒pBT-mazE。将pBT-mazE转化至大肠杆菌报告菌株XL-1 Blue MRF′Kan,检测诱饵蛋白mazE-λcI的表达。将pBT-mazE和pTRG空载体共转化报告菌株XL-1 Blue MRF′Kan,通过3-氨基-1,2,4-三氮唑(3-amino-1,2,4-triazole,3-AT)选择性筛选平板检测诱饵质粒的自激活作用。结果酶切和测序结果显示MazE蛋白编码序列成功克隆入载体pBT,融合区读码框正确。诱饵质粒pBT-mazE能够表达诱饵蛋白mazE-λcI。 pBT-mazE和pTRG空载体共转化的报告菌株XL-1 Blue MRF′Kan在含有3-AT的选择性筛选平板上无菌落生成,而在no 3-AT非选择性筛选平板上生长良好,表明诱饵质粒pBT-mazE在细菌双杂交系统中无自激活作用。结论所构建的诱饵载体pBT-mazE可以用于细菌双杂交的进一步实验。