期刊简介
本刊系医药卫生类综合性学术期刊，主要刊登医学基础研究、临床实验研究、预防医学和全科医学方面的论著、综述，也刊登临床方法学、经验介绍方面的论文。
往期目录
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>徐州医科大学学报杂志
- 杂志名称：徐州医科大学学报杂志
- 主管单位：江苏省教育厅
- 主办单位：徐州医科大学
- 国际刊号：2096-3882
- 国内刊号：32-1875/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年徐州市科技期刊一等奖期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
大鼠MKK7真核表达质粒的构建及其在COS7细胞中的转染效率
代春潇；宋远见；张云山；赵小芳；王玉兰
关键词：真核表达质粒, COS7, 转染效率, 脂质体
摘要：目的 探索大鼠丝裂原活化蛋白激酶激酶7(mitogen activated protein kinase kinase 7,MKK7)基因在体外细胞实验中的表达调控规律.方法 利用分子生物学方法将大鼠MKK7全长cDNA序列克隆到编码增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, eGFP)和Flag(编码DYKDDDDK亲水性多肽)标签的真核表达载体Pvp16-AD中,构建出Pvp16-Flag-MKK7-eGFP 重组质粒.通过酶切及DNA测序的方法验证重组质粒序列的正确性后,采用脂质体介导方法将重组质粒瞬时转染COS7细胞,通过荧光显微镜观察质粒与脂质体不同比例情况下以及确定高转染效率的比例后不同时间段大鼠MKK7基因表达情况.结果 成功构建重组真核表达质粒Pvp16-Flag-MKK7-eGFP.酶切及DNA测序方法确定重组质粒中大鼠MKK7序列与原序列一致.重组质粒与脂质体的比例为1∶3时,重组质粒在COS7细胞中的转染效率高,差异具有统计学意义(P<0.05).质粒转染后72 h时,COS7细胞中MKK7蛋白表达量相对高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠MKK7重组真核表达载体的构建及其在COS7细胞中转染效率的探索工作为研究大鼠MKK7基因在体外引起细胞分化、增殖、凋亡、炎症反应和应激反应等一系列生物学改变奠定基础.
友情链接